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CAR-T 治療：T細胞分選EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit
人免疫系統(tǒng)（immune system）是防衛(wèi)病原體入侵zui有效的武器，具有以下功能：
免疫防御：識別和清除外來入侵的抗原，如病原微生物等。
免疫監(jiān)視：識別和清除體內(nèi)發(fā)生突變的腫瘤細胞或其他有害的成分。
免疫自穩(wěn)：識別和清除體內(nèi)變性、衰老、死亡的細胞，維持體內(nèi)環(huán)境相對穩(wěn)定。
免疫細胞治療是一種將患者自體的免疫細胞在體外培養(yǎng)、活化、擴增，再回輸入患者體內(nèi)，利用患者自身免疫細胞殺傷腫瘤細胞進行治療的生物治療技術。
免疫細胞治療惡性腫瘤一直是醫(yī)學界研究的熱點，相對于傳統(tǒng)腫瘤治療（手術、化療、放療），優(yōu)勢已經(jīng)越來越明顯，在一些腫瘤疾病類型上，甚至已經(jīng)取代傳統(tǒng)的治療手段，成為一線治療方法，比如這幾年的研究大熱點CAR-T治療，在治療血液性腫瘤上面取得了突破性的成績，國內(nèi)外制藥大公司注冊的CAR-T臨床試驗高達百個。
免疫細胞
CAR-T細胞 NK細胞 CIK細胞
CAR-T免疫細胞治療模式
CAR-T免疫細胞療法流程的相關階段
病人來源的T細胞樣本（PBMC等）——T細胞分離分選——CAR-T細胞活化、擴增，基因工程改造——CAR-T細胞回輸
CAR-T是一種通過基因工程改造T細胞對白血病的血液腫瘤細胞進行攻擊的免疫療法。截止去年十月，已有諾華和Kite兩家公司獲得FDA認證的唯二基因療法。CAR-T免疫細胞療法大熱中。這兩個臨床成功的CAR-T療法都對來自病人的外周血進行磁珠分選篩選T細胞。Stemcell的EasySep™人T細胞富集分選試劑盒可以用于CAR-T療法的T細胞分選階段（免疫磁珠細胞分選法）。EasySep™人T細胞富集分選試劑盒的磁珠分選采用負選方式，可以避免標記T細胞，以防標記抗體對T細胞造成傷害，zui大程度保持T細胞的untouched活性，立即用于下游CAR-T研究。
T細胞負選方案介紹
在負選時，非目標細胞通過針對細胞表面抗原的抗體被去除。負選試劑中的抗體組合確定哪些細胞被去除。
以下情況，比較適合負選：
需要未經(jīng)標記的細胞
若將抗體結合到目標細胞上會造成抑制或活化，影響下游研究
目標細胞沒有特異性抗體可用來標記
需要去除某些類型的細胞
EasySep™人T細胞富集試劑盒可用于從新鮮或凍存外周血單個核細胞中通過負選方式分離T細胞。不需要的細胞被識別非T細胞的四聚體抗體復合物（Tetrameric Antibody Complexes）和dextran包被的磁珠標記后移除。被標記細胞不需要過柱，使用EasySep™磁極就能簡單分離。需要的細胞被倒到新管子。分離細胞可以立即用于下游：流式細胞術、細胞培養(yǎng)（CAR-T免疫療法）或DNA/RNA提取。
推薦使用新版EasySep™人T細胞分選試劑盒（貨號：17951），短至8分鐘即可完成免疫磁珠細胞分選。
EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit targets non-T cells for removal with antibodies recognizing specific cell surface markers. Unwanted cells are labeled with antibodies and magnetic particles, and separated without columns using an EasySep™ magnet. Desired cells are simply poured off into a new tube. Isolated cells are immediay available for downstream applications such as flow cytometry, culture, or DNA/RNA extraction.
基本信息
中文名稱 EasySep™人T細胞富集試劑盒
英文名稱 EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit
用于標記1 x 109個細胞
EasySep™人T細胞富集試劑盒是套裝，包含：
EasySep™ Human T Cell Enrichment Cocktail（1mL） T細胞富集抗體復合物
EasySep™ D Magnetic Particles（1mL） 磁珠
貨號：19051
保存 2 - 8°C，不能冷凍。
EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit適用樣本
EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit可用于從各種樣本來源中分選高純度的人T細胞，包括：新鮮或凍存外周血單個核細胞（PBMCs）、白細胞單采術（Leuko Pak）樣本。目標細胞被抗體復合物和磁珠標記，以進行負選。
淋巴細胞分離液
GE Ficoll Paque淋巴細胞分離液是一種無菌、即用型的淋巴細胞分離液，根據(jù)外周血中各類細胞在密度梯度離心中呈現(xiàn)不同的密度梯度分布而將全血中的淋巴細胞等單個核細胞進行分離。適用人外周血、骨髓和臍帶血的單個核細胞分離。Ficoll Paque PREMIUM經(jīng)GMP認證，適合臨床使用。
GE | 17-1440-02 | Ficoll Paque PLUS,1.078 g/ml淋巴細胞分離液 | 6×100 ml |
GE | 17-1440-03 | Ficoll Paque PLUS,1.078 g/ml淋巴細胞分離液 | 6×100 ml |
GE | 17-5442-02 | Ficoll Paque PREMIUM,1.078 g/ml淋巴細胞分離液 | 6×100 ml |
GE | 17-5442-03 | Ficoll Paque PREMIUM,1.078 g/ml淋巴細胞分離液 | 6×100 ml |
免疫磁珠分選
Stemcell免疫磁珠分選
品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品描述 |
Stemcell | 19051 | EasySep Human T Cell Enrichment Kit EasySep™人T細胞富集試劑盒 |
Stemcell | 17951 | EasySep™Human T Cell Isolation Kit，EasySep™人T細胞富集試劑盒的新版 |
Stemcell | 17851 | EasySep™ Human CD3 Positive Selection Kit II，T細胞正選 |
Stemcell | 18000 | EasySep™磁極 |
Stemcell | 20144 | EasySep™Buffer |
Miltenyi免疫磁珠分選
臨床級CART制備方案
品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品描述 |
Miltenyi | 200-070-132 | CliniMACS CD4 Reagent CE |
Miltenyi | 200-070-115 | CliniMACS D8 Reagent |
Miltenyi | 200-070-119 | CliniMACS CD62L Reagent CE |
Miltenyi | 200-070-131 | CliniMACS CD25 Reagent, CE |
Miltenyi | 200-070-146 | CliniMACS CD45RA Reagent |
Miltenyi | 200-070-117 | CliniMACS CD19 Reagent, CE |
Miltenyi | 200-070-118 | CliniMACS CD14 Reagent, CE |
Miltenyi | 200-073-104 | CliniMACS Tubing Set, CE |
Miltenyi | 130-097-184 | CliniMACS Prodigy TS 510 for Research Use |
T細胞級亞群的分選
Miltenyi | 130-091-114 | CD2 MicroBeads, human | 2 mL |
Miltenyi | 130-050-101 | CD3 MicroBeads, human | 2 mL |
Miltenyi | 130-098-193 | MACSxpress Pan T Cell Isolation Kit | 1 kit |
Miltenyi | 130-096-535 | Pan T Cell Isolation Kit, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-091-264 | CD6 MicroBeads, human | 2 mL |
Miltenyi | 130-093-247 | CD28 MicroBead Kit, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-097-095 | Naive Pan T Cell Isolation Kit, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-045-101 | CD4 MicroBeads | 2 mL |
Miltenyi | 130-055-101 | CD4 Multisort Kit, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-096-533 | CD4+T Cell Isolation Kit | 1 kit |
Miltenyi | 130-045-201 | CD8 MicroBeads | 2 mL |
Miltenyi | 130-055-201 | CD8 Multisort Kit, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-096-495 | CD8+ T Cell Isolation Kit去除分選，untouched細胞 | 1 kit |
Miltenyi | 130-094-131 | Naive CD4+ T Cell Iso Kit II, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-091-758 | CD62L MicroBeads, human | 2 mL |
Miltenyi | 130-045-901 | CD45RA MicroBeads, human | 2 mL |
Miltenyi | 130-046-001 | CD45RO MicroBeads, human | 2 mL |
Miltenyi | 130-094-302 | CD4+ Central Mem T Cell Isoaltion Kit,human | 1 kit |
Miltenyi | 130-093-244 | Naive CD8+ T Cell Iso Kit, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-045-901 | CD45RA MicroBeads | 2 mL |
Miltenyi | 130-046-001 | CD45RO MicroBeads, human | 2 mL |
Miltenyi | 130-094-412 | CD8+ Memory T Cell Isolation Kit, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-042-301 | MidiMACS™ Starting Kits，LS | 1 kit |
Miltenyi | 130-090-329 | MidiMACS™ Starting Kits，LD | 1 kit |
Miltenyi | 130-091-758 | CD62L MicroBeads | 2 mL |
Miltenyi | 130-091-221 | autoMACS® Running Buffer – MACS® Separation Buffer | 6×1.5 L |
Miltenyi | 130-091-222 | autoMACS® Rinsing solution | 6×1.45 L |
Miltenyi | 130-091-376 | autoMACS® Running Buffer – MACS® Separation Buffer | 6×75 mL |
激活：CAR-T細胞 CIK細胞
T細胞活化抗人CD3單克隆抗體（Functional，clone: OKT3）可以與TCR復合物結合，激活T細胞。SAFIRE(Sodium Azide Free Immensely Reduced Endotoxins) 類產(chǎn)品是BioGems品牌下的功能性抗體產(chǎn)品。
Dynabeads® Human T-Activator CD3/CD28 用于活化和擴增人 T 細胞和 T 細胞克隆，以作研究之用。Dynabeads® CD3/CD28 T Cell Expander 提供了活化和擴增 T 細胞的簡單方法，無需抗原呈遞細胞或抗原。 Dynabeads® Human T-Activator CD3/CD28 是均勻的 4.5 µm 超順磁珠，與抗 CD3 和抗 CD28 單克隆抗體的優(yōu)化混合物偶聯(lián)。通過使抗 CD3 和抗 CD28 抗體與 Dynabeads® 結合，這種微珠可以提供 T 細胞活化和擴增所需的原始和共刺激信號。
RetroNectin®重組人纖維蛋白片段和CD3單克隆抗體（OKT3）兩者共同作用可以刺激T細胞的增殖和分化。
品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品描述 | 包裝 |
PeproTech/BioGems | 05121-25-500 | Anti-Human CD3 mAb （克隆號OKT3） | 500μg |
PeproTech/BioGems | 10311-25-500 | Anti-Human CD28 mAb（克隆號CD28.2） | 500μg |
GIBCO | 11131D | Dynabeads™ Human T-Activator CD3/CD28 磁珠 | 2 mL |
StemCell | 10971 | ImmunoCult™ Human CD3/CD28 T Cell Activator | 2 mL |
StemCell | 10970 | ImmunoCult™ Human CD3/CD28/CD2 T Cell Activator | 2 mL |
PeproTech | AF-200-02 | 重組人IL-2 (Animal Free) | 50ug/ 100ug |
PeproTech | AF-300-02 | 重組人IFN-γ(Animal Free) | 100ug |
品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品描述 | 包裝 |
TAKARA | T100B | RetroNectin® Recombinant Human Fibronectin Fragment 重組人纖維蛋白片段 | 2.5mg |
TAKARA | T100A | 0.5mg | |
TAKARA | T201 | RetroNectin® Recombinant Human Fibronectin Fragment 重組人纖維蛋白片段，GMP級 | 2.5 mg 凍干粉 |
擴增：免疫細胞培養(yǎng)基
品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品描述 | 包裝 |
Corning | 88-581-CM | KBM581, serum-free medium for DC and CIK DC/CIK 細胞無血清培養(yǎng)基 | 1 L/瓶 |
StemCell | 10981 | ImmunoCult™-XF T Cell Expansion Medium 無血清T細胞擴增培養(yǎng)基 | 500mL/瓶 |
TAKARA | GT-T551 H3 | 淋巴細胞、DC細胞、NK細無血清胞培養(yǎng)基 | 1000 ml |
檢測
細胞增殖檢測
品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品描述 | 包裝 |
PeproTech/BioGems | 63310-00-500 | CFSE | 500 mg |
細胞凋亡檢測
品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品描述 | 包裝 |
PeproTech/BioGems | 60910-00 | Propidim Iodide Solution | 200 tests 500 tests |
PeproTech/BioGems | 61410-00 | 7-AAD Solution | 200 tests 500 tests |
慢病毒檢測
TAKARA | 632200 | Lenti-X p24 Rapid Titer Kit慢病毒滴度測定 p24 ELISA 試劑盒 | 1 kit |
Gibco | 11913-019 | CD 293 無蛋白培養(yǎng)基 | 1000 mL |
CAR-T凍存
GMP級BioLife Solutions細胞凍存液
BioLife Solutions | 210102 | CryoStor CS10 Freeze Media 細胞DMSO凍存液
| 100 mL/瓶 |
BioLife Solutions | 202102 | CryoStor CS2 Freeze Media 細胞DMSO凍存液
| 100 mL/瓶 |
BioLife Solutions | 205102 | CryoStor CS5 Freeze Media 細胞DMSO凍存液
| 100 mL/瓶 |
細胞凍存袋
OriGen CryoStore 細胞凍存袋
品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品描述 | 包裝 |
OriGen | CS25N | CryoStore 25 EVA 凍存袋，N型管路 | 24個/箱 |
OriGen | CS50 | CryoStore 50 EVA 凍存袋 | 24個/箱 |
OriGen | CS250 | CryoStore 250 EVA 凍存袋 | 24個/箱 |
OriGen | CS250N | CryoStore 250 EVA 凍存袋，N型管路 | 24個/箱 |
EasySep Human T Cell Enrichment Kit 訂購信息
細胞類型 | 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 純度 | 適用的染色抗體 |
T細胞 | 17951 17951RF | EasySep Human T Cell Isolation Kit EasySep™人T細胞分選試劑盒 | 96.7 ± 1.5% | CD2（貨號#60007） CD3（貨號#60011） CD4（貨號#60016） CD8a（貨號#60022） CD45（貨號#60018） |
19051 19051RF | EasySep Human T Cell Enrichment Kit EasySep™人T細胞富集試劑盒 | 95.0 - 99.0% |
說明：RF：貨號后加RF，比如17951RF，代表RoboSep™試劑盒：包含EasySep™分選試劑盒、RoboSep™緩沖液和1-2盒RoboSep™槍頭。
分選試劑盒和富集試劑盒的主要區(qū)別：分選試劑盒是富集試劑盒的更新版，實驗耗時更少。
EasySep Human T Cell Enrichment Kit 19051以及更多CAR-T免疫細胞治療GMP級產(chǎn)品華雅再生醫(yī)學旗艦公司：紅榮微再（上海）生物工程技術有限公司 ：1500 1904 520。紅榮微再-客服: 2395557778 經(jīng)銷商專員
紅榮微再以“傳遞科學價值，服務科學研究”為宗旨，主營干細胞、醫(yī)療、細胞治療、器官再生四大板塊的產(chǎn)品。
地址：上海市閔行區(qū)顧戴路2337號維璟中心G幢19C2
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